在光学显微镜下精确测量微生物的大小,主要依赖于目镜测微尺这一工具,并遵循一系列严谨的操作步骤。以下是详细的测量步骤:
一、校正目镜测微尺
准备工具:
已知长度的镜台测微尺:用于校正目镜测微尺。
目镜测微尺:安装在显微镜的目镜上,用于测量微生物的大小。
校正过程:
将镜台测微尺放在显微镜的载物台上,并使其刻度朝上。
将目镜测微尺放入目镜内,并调整显微镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度线重合。
观察并记录镜台测微尺上某一长度(如10格)在目镜测微尺上对应的格数。
根据已知镜台测微尺的长度和目镜测微尺上的格数,计算出目镜测微尺每格所代表的实际长度,即校正值。
这个过程需要在低倍镜、高倍镜及油镜下分别进行,因为不同放大倍数下,目镜测微尺的每格长度会有所不同。
二、制备微生物样本
取样:从待测微生物群体中随机选取一定数量的样本。
制片:将样本制成水浸片或染色涂片,并放置在显微镜的载物台上。
三、测量微生物大小
调焦与定位:
使用显微镜的低倍镜先找到微生物的视野。
然后逐渐转换到高倍镜或油镜,并调整焦距使微生物图像清晰。
测量:
使用目镜测微尺测量微生物的宽度和长度。在测量时,应注意微生物的形态可能因放大倍数而有所变化,因此需要在同一放大倍数下进行测量。
记录每个微生物的宽度和长度所对应的目镜测微尺格数,并乘以相应的校正值,得到微生物的实际宽度和长度。
重复测量:为了提高测量的准确性,通常需要测量多个(如10个)微生物样本,并计算其平均值作为Z终结果。
四、注意事项
在测量过程中,应确保显微镜的放大倍数、焦距等参数保持不变,以避免测量误差。
对于形态不规则的微生物,应选择合适的测量方法和参数进行描述和记录。
在使用油镜时,应注意镜头的保护和清洁,避免镜头与玻片相撞或污染。
通过以上步骤,可以在光学显微镜下精确测量微生物的大小,为微生物学研究和应用提供可靠的数据支持。同时,需要注意的是,不同的微生物测量方法和仪器有其优缺点,可以根据需要进行选择。