光学显微镜是一种利用光学原理,将肉眼所不能分辨的微小物体放大成像以供人们提取微细结构信息的光学仪器。而数值孔径(Numerical Aperture,简称NA),是光学显微镜,尤其是其物镜的一个重要技术参数,以下是关于光学显微镜数值孔径的详细介绍:
一、定义与计算公式
数值孔径描述了透镜(或光学系统)收光锥角的大小,决定了透镜的收光能力和空间分辨率。它是子午光线能进入或离开纤芯(光学系统或光学器件)的大圆锥的半顶角之正弦,乘以圆锥顶所在介质的折射率。计算公式为:NA=n×sin(θ/2),其中n是物体与物镜间媒质的折射率,θ是孔径角(又称“镜口角"),即物镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度的两倍。
二、性质与特点
无量纲数:数值孔径是一个没有单位的量,用于衡量光学系统收集光的能力。
影响成像质量:数值孔径越大,成像质量越好。因为更大的数值孔径意味着能够收集到更多的光线,从而提高图像的亮度和清晰度。
与物镜性能密切相关:数值孔径是判断物镜性能(如分辨率、焦深、亮度等)的重要指标。一般来说,数值孔径越大,物镜的分辨率越高,但焦深会相应减小。
三、影响因素与调节方法
介质折射率:在孔径角固定的情况下,增大介质折射率n值可以增大数值孔径。因此,在实际应用中,可以通过使用水浸物镜、油浸物镜等方法来提高数值孔径。例如,水浸物镜的介质折射率为1.333,油浸物镜的介质折射率可达1.515或更高(如使用溴萘作为介质,折射率为1.66)。
孔径角:孔径角越大,进入物镜的光通量就越大。然而,在显微镜系统中,对于给定的物镜,孔径角已经固定,因此无法直接通过改变孔径角来调节数值孔径。
四、与其他技术参数的关系
分辨率:数值孔径与分辨率成正比。分辨率指成像过程中光点呈现差异的Z小分辨距离,表示为d=λ/NA(其中d为Z小分辨距离,λ为光纤的波长)。因此,数值孔径越大,分辨率越高。
放大率:数值孔径与放大率也成正比。但需要注意的是,放大率不仅受数值孔径的影响,还受其他因素(如物镜的设计、制造精度等)的制约。
焦深:焦深与数值孔径的平方成反比。因此,数值孔径增大时,焦深会相应减小。这意味着在观察过程中需要更加精确地调节焦距以获得清晰的图像。
视场宽度与工作距离:数值孔径增大时,视场宽度与工作距离都会相应地变小。这限制了观察范围并增加了操作难度。
综上所述,数值孔径是光学显微镜物镜的一个重要技术参数,它直接影响了成像质量、分辨率、放大率等多个方面。在实际应用中,需要根据具体需求选择合适的物镜和调节方法以获得Z佳的观察效果。