光学显微镜的多种观察方式各有其特点和应用场景,以下是这些观察方式的详细介绍:
明场观察
特点:这是很常用的显微观察方法,适用于观察标本的颜色、透射率等。
优点:应用广泛,操作简单;视野亮度高、均匀;较好的色彩还原、图像平坦;价格相对较低;物镜也可用于荧光观察(如绿色、红色荧光)。
缺点:成像对比度低(透明或未染色标本)、缺乏立体感、应用局限。
应用领域:常规镜检、病理、染色标本等。
暗场观察
原理:基于丁道尔现象,微粒对斜射光反射或衍射,增大了对人眼可见性。
特点:可以观察在普通明场中看不见的微小标本(如细菌、微粒等),分辨率可达20nm ~ 4nm,实现超显微观测。
缺点:只能观察到物体存在、外部轮廓、运动状态等;物镜使用存在局限,不方便调节;对标本要求较高。
应用:微小粒子、细菌形态观察、细菌记数、透明标本观察等。
浮雕相衬显微镜
特点:利用斜射光照射到标本产生折射、衍射,光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影,使透明标本表面产生明暗差异,增加观察对比度。
应用:透明或半透明样本的观察。
微分干涉称镜检术
原理:利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束,分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,使图象呈现出立体的三维感觉。
特点:不仅能观察无色透明的物体,而且图象呈现出浮雕状的立体感,观察效果更为逼真。
应用:细胞生物学、材料科学等领域。
偏光显微镜
特点:鉴定物质细微结构光学性质的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚。
应用:矿物学、化学、生物学等领域。
相差镜检法
特点:利用被检物体的光程之差进行镜检,有效地利用光的干涉现象,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,使无色透明的物质也可成为清晰可见。
应用:广泛应用于倒置显微镜,便利了活体细胞的观察。
荧光显微镜
特点:用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。
应用:生物学、医学、化学等领域,尤其是细胞和组织的荧光标记成像。
以上观察方式各有其优点和适用场景,用户可以根据具体需求选择合适的观察方式。同时,光学显微镜的操作还包括调节亮度、物镜、目镜、聚焦、移动样本、调节光圈等步骤,这些步骤的正确执行对于获得清晰的观察图像至关重要。