你的位置:首页 > 技术文章 > 倒置荧光显微镜使用时可能需要的问题有哪些?

技术文章

倒置荧光显微镜使用时可能需要的问题有哪些?

技术文章
倒置荧光显微镜,是指与一般显微镜相比,其物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,由荧光附件与显微镜有机结合构成的显微镜。激发光从物镜向下落射到标本表面,被反射到物镜中并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,经双色束分离器使激发光和荧光分开而成像。物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。
 
倒置荧光显微镜使用时可能需要的问题有哪些?
 
1、正确观察白光的步骤?
 
将标本置于载物台上,打开电源开关;将转盘聚光器调整到明视场,然后将环状光阑调整到z大光圈;从低倍镜开始观察。
 
2、相差环中BF/PHL/PH2等这些字母到底是什么意思?
 
倒置荧光显微镜本身是结合了荧光附件和相差显微镜的特点。那么在相差环中的这些字母分别代表了:PHL(4×0.13)、PH1(20×0.45)、PH2(40×0.6)、BF代表的是白光。所以如果我们观察的是荧光,前三种相差是都可以选择的。所谓的相差可以理解成是对于透明结构的放大处理,因为细胞本身内部结构是透明的,我们想观察细胞内部结构的时候就需要使用相差。
 
3、无论怎么调整细准焦螺旋,镜下的图像都不清楚?
 
这种情况下很可能是镜头不干净,可以用酒精棉擦拭一下镜面。另外高倍数的物镜镜头外也有一个旋钮,适当旋转这个旋钮也会使画面变得清晰。
 
4、正确观察荧光的步骤?
 
关闭室内的灯光,打开白光电源和汞灯电源,一般汞灯需要提前打开10分钟预热才能达到zui亮;关闭荧光shutter,用低倍镜找到细胞位置;关闭透射光按钮,打开荧光光路shutter,旋转荧光滤色转盘;电脑显示器中观察。
荧光光路shutter要zui后打开,zui先关闭,这样可以保护样本,避免过度的荧光猝灭。
 
5、如何维护汞灯?
 
汞灯在工作时会散发出较大的热量,因此要保持室内温度不要过高,具有良好的散热环境。一个汞灯的工作寿命一般是200个小时,但并不是使用时间越短,观察的越快,越能延长汞灯的寿命。相反的,如果工作时间越短,反而会让汞灯寿命减少的越快,所以要尽量减少开关的次数。
 
6、为什么目镜下观察到的图像只有一半儿?
 
出现这种情况的原因一般是CT环调整出现了问题。CT环位于目镜下方,也叫合轴调中目镜,有CT/O/S三个参数设置。CT对应的是光路对准了望远镜;O对应的是光路中没有物体;S对应的是光路中有遮光板。那么上述情况就是CT环这个螺旋位于CT和S两个参数之间。

联系我们

contact us

咨询电话

4001-123,022

扫一扫,关注我们

返回顶部